项目简介

以痘病毒为代表的DNA病毒对规模化养殖业危害极大，为了探寻机体抗病毒的分子机制，本研究通过qRT-PCR和Western-blot技术研究PGAMs在不同组织和细胞中的表达谱，结果表明PGAMs家族成员主要在心脏、肾脏、淋巴结组织中表达水平高；通过激光共聚焦显微镜对其细胞和亚细胞定位进行研究，结果表明PGAMs主要定位于细胞质的高尔基体、内质网，痘病毒感染后其亚细胞定位没有发生变化；通过GST-pull down和Co-IP技术研究PGAMs与cGAS、STING的相互作用，结果表明PGAM1、PGAM2、PGAM4与cGAS蛋白能够相互作用，而PGAM1、PGAM2和PGAM4与STING蛋白没有相互作用，PGAM5与cGAS和STING均能相互作用；以Hela细胞为研究对象，通过激光共聚焦显微镜证明了外源性PGAM5在线粒体的亚细胞定位；以MDBK细胞为研究对象验证了内源性PGAM5，感染和非感染状态下都定位于线粒体，且痘病毒感染后PGAM5线粒体的定位不发生改变；信号通路研究结果表明，痘病毒感染后能通过PGAM5激活cGAS-STING信号通路，且随着痘病毒感染时间和感染强度的增加，对下游关键分子及干扰素的诱导能力增强；基因工程技术表达纯化的gcGAS酶蛋白，能够体外酶促催化合成山羊源2′3′-cGAMP，并能诱导靶细胞分泌IFN-β和TNF-α，并在体外发挥抑制病毒增殖的作用，具有良好的抗病毒效果。本项目的开展为新型广谱抗DNA病毒疫苗及药物的设计提供重要的科学依据，同时也为DNA病毒病的防控提供理论支撑，从而为我国畜牧业的健康快速发展保驾护航。

成果应用

本发明的CpG寡聚脱氧核苷酸具有增强B细胞增殖和ThΙ型免疫反应的能力，与油乳剂ISA

206按一定比例混合、乳化而成，工艺简单，性能稳定，可促进抗体的提前产生并具有强烈的免疫增强作用。

合作方式

联合开发或技术入股。

GST pull-down验证PGAM5与cGAS、STING的互作

Co-IP验证PGAM5与cGAS、STING的互作

PGAM5与cGAS、STING在HEK293T活细胞的共定位

负责人：张艳18249627571